In vitro indukovaná polyploidie u hrachu setého (Pisum sativum L.)

Jozef Andel

Bakalářská práce

In vitro polyploidy induction of Pisum sativum L.

Anotace:

Pisum sativum, v českém jazyce známý jako hrách setý je jednoletá vyšší rostlina z čeledi Fabaceae pěstovaná pro svá zralá i nezralá semena a je nejrozšířenější luštěninou mírného pásma. Semena hrachu mají vysoký obsah bílkovin (a to přibližně 2 krát více než v obilninách) minerálů, aminokyselin a vitamínů. I přes tyto výhody tvoří pouze cca 10 % lidské výživy. Ve větší míře je využíván jako krmivo v podobě siláže nebo směsí s obilninami. Hlavním cílem práce bylo získat autopolyploidní rostliny Pisum sativum L. z diploidních rostlin (2n=2x=14) pomocí in vitro indukované polyploidie. Polyploidie byla indukována u nodálních segmentů pěstovaných na MS mediu (Murashige & Skoog 1962). Bylo použito antimitotické činidlo oryzalin v koncentraci 100 µM po dobu 24 a 48 hodin. Úroveň ploidie byla určena pomocí průtokové cytometrie. Celkem bylo získáno 8 tetraploidních rostlin. Z toho 5 rostlin po 48 hodinách a 3 rostliny po 24 hodinách působení oryzalinu. Nové genotypy byly morfologicky rozdílné. Statisticky byl prokázán větší průměr stonku u tetraploidních rostlin. Dle dostupných zdrojů byla metoda in vitro indukované polyploidie u P. sativum použita poprvé.

Abstract:

Pisum sativum, an annual plant of the Fabaceae family. It is grown for its ripe and unripe seeds and it is the most common legume of temperate climate. Pea seeds have high content of protein (cca twice as much as cereals), minerals, amino acids and vitamins. Despite these properities pea is only 10 % of human food. It is rather used as feed for animals. Main goal of this paper was to gain autopolyploid plants of Pisum sativum L. from diploid plants (2n=2x=14) using in vitro induced polyploidy. Polyploidy was induced on nodal segments cultivated on MS medium (Murashige & Skoog 1962). Oryzalin was used as antimitotic agent in concentration 100 µM for 24 and 48 hours. Ploidy level was measured with flow cytometry. A total of 8 tetraploid plants were obtained. Of which 5 plants after 48 hours and 3 plants after 24 hours of oryzalin exposure. New genotypes were morphologically different. Larger stem diameter of tetraploids was statisticly proved with Mann-Whitney U-test. According to available sources was the method of in vitro induced polyploidy on P. sativum never used before.

Klíčová slova

Hrách setý (Pisum sativum L.), mikropropagace, nodální segmenty, průtoková cytometrie, Fabaceae

Keywords

Pisum sativum L., micropropagation, nodal segments, flow cytometry, Fabaceae

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 19. 5. 2023

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 24. 5. 2023
• Vedoucí: prof. Ing. Eloy Fernández Cusimamani, Ph.D.
• Oponent: Yamen Homaidan Shmeit

Česká zemědělská univerzita v Praze

Fakulta tropického zemědělství

Bakalářský studijní program:
Tropické zemědělství