Vliv deltaNp63alfa na vnitrobuněčný transport proteinů u buněk karcinomu prsu

Bc. Radka Černochová

Master's thesis

Role of deltaNp63alpha in intracellular protein transport in breast cancer cells

Anotácia:

Protein Rab7b je nedávno identifikovaný člen proteinové rodiny Rab, která hraje důležitou úlohu ve vnitrobuněčném transportu proteinů. Tato diplomová práce se zabývá vlivem proteinové izoformy ΔNp63α na expresi Rab7b u buněk karcinomu prsu a také vlivem Rab7b na vlastnosti těchto buněk. Teoretická část práce je věnována stručnému popisu zapojení proteinů rodiny p53 do procesu karcinogeneze, obecné charakterizaci proteinové rodiny Rab a shrnutí dosavadních poznatků o proteinu Rab7b. Experimentální část práce navazuje na předchozí výsledky a sleduje vliv ΔNp63α na expresi Rab7b u buněk odvozených od karcinomu prsu. Potvrdili jsme nárůst hladiny mRNA i proteinu Rab7b po indukci exprese ΔNp63α u buněk MDA MB 468 ΔNp63α a zapojení aktivace EGFR signální dráhy do tohoto regulačního procesu. Vliv ΔNp63α na expresi Rab7b jsme ověřili i u dalších buněk, ale nejedná se o jev obecně platný pro všechny buněčné linie odvozené od karcinomu prsu. V další části práce byl sledován vliv exprese proteinu Rab7b na adhezní, proliferační i migrační vlastnosti buněk a na změny v jejich metabolické aktivitě. Ačkoliv byly pozorovány rozdílné výsledky u jednotlivých buněčných linií, předpokládáme, že deregulace exprese Rab7b způsobuje změny v proliferaci, adhezi a metabolické aktivitě buněk odvozených od karcinomu prsu.

Abstract:

Protein Rab7b is a recently identified member of Rab protein family that plays an important role in intracellular protein traffic. This diploma thesis studies the effect of ΔNp63α protein on Rab7b expression in breast cancer cells and the influence of Rab7b on properties of these cells. The theoretical part is focused on a brief description of the involvement of the p53 protein family members to the process of carcinogenesis, on the general characterization of the protein family Rab and summarized the existing knowledge about Rab7b protein. The experimental part of the thesis follows on the previous results and studies the impact of ΔNp63α on Rab7b expression in cells derived from breast cancer. We confirmed the increasing amount of Rab7b mRNA and Rab7b protein after induction of ΔNp63α expression in MDA MB 468-ΔNp63α cell line and moreover we detected the involvement of EGFR signaling pathway activation into this regulatory process. We confirmed the effect of ΔNp63α on the Rab7b expression in other cell lines, but this is not a general phenomenon applicable for all cell lines derived from breast cancer. In the next part, we studied the effect of Rab7b protein on cell adhesion, proliferation, migration and changes in metabolic activity. Although we observed different results for the individual cell lines, we can suppose that the deregulation of Rab7b expression causes changes in proliferation, adhesion and metabolic activity of breast cancer cells.

Kľúčové slová

Karcinom prsu, deltaNp63alfa, vnitrobuněčný transport proteinů, Rab proteiny, cyklus Rab proteinů, Rab7b, breast cancer, deltaNp63alpha, intracellular protein transport, Rab proteins, Rab protein cycle

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 12. 5. 2016

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 8. 6. 2016
• Vedúci: Mgr. Jitka Holčáková, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / odbor:
Biochemistry / Biochemistry