Využití rekombinantních antigenních proteinů a syntetických peptidů v serodiagnostice Trichinella spiralis a T. pseudospiralis.

Bc. Karolína Snížková

Diplomová práce

Recombinant protein and synthetic antigenic peptides as a serodiagnostic markers of Trichinella spiralis and T. pseudospiralis.

Anotace:

Kosmopolitně rozšíření zástupci rodu Trichinella jsou původci závažného onemocnění zvaného trichinelóza. Hostitel se nakazí konzumací syrového nebo nedostatečně tepelně upraveného masa obsahujícího infekční larvy L1. K infekci jsou vnímaví téměř všichni obratlovci. Zejména u člověka se mohou rozvinout i vážné klinické příznaky. Tyto parazitické organismy ohrožují nejen lidské zdraví, ale v souvislosti s produkcí vepřového a jiného masa představují i hospodářský problém. Z těchto důvodů byl v Evropské unii zaveden systém kontrol masa určeného k lidské spotřebě. K tomuto účelu je prozatím využívána pouze pracná přímá trávicí metoda. Alternativou by mohla být sérodiagnostika s využitím exkrečně sekrečních (E S) molekul těchto parazitů, některých jejich proteinových složek nebo z nich odvozených syntetických peptidových markerů. V předložené práci byly metodami ELISA a imunoblot sledovány interakce E-S produktů, rekombinantních forem proteinů T. spiralis a T. pseudospiralis – „Multi Cystatin-like Domain“ (MCD) a syntetických peptidových antigenů (odvozených od T. spiralis MCD, 43 kDa glykoprotein, 53 kDa protein) s polyklonálními protilátkami z krevních sér experimentálně infikovaných myší nebo myší imunizovaných rekombinantním proteinem – rMCD.

Abstract:

The worldwide distributed Trichinella spp. are the causative agents of serious disease called trichinellosis. The host can be infected after eating raw or undercooked meat containing infectious L1 larvae. Almost all vertebrates are susceptible to the infection. Especially humans may develop serious clinical symptoms. These parasitic organisms represent a treat not only for public health, but they are also related to economic problem in connection with the production of pork and other kinds of meat. Therefore, a strict system of meat control (intended for human consumption) was introduced in the European Union. Currently, still only laborious direct digestive method is used for parasitological examination. Serodiagnosis using the excretion secretory (E-S) molecules of these parasites, some of their protein components, or derived synthetic peptide markers could present a possible alternative. In this thesis ELISA and immunoblot assays were used to evaluate the interactions of E-S products, recombinant protein forms T. spiralis and T. pseudospiralis - "Multi Cystatin-like Domain" (MCD), and synthetic peptide antigens (derived from T. spiralis MCD, 43 kDa glykoprotein, 53 kDa protein) with polyclonal antibodies in blood sera of experimentally infected mice or mice immunized with recombinant protein - rMCD.

Klíčová slova

Trichinella, trichinelóza, sérodiagnostika, MCD protein, 43 kDa glykoprotein, 53 kDa protein, syntetické peptidy, poly-L-lysin, ELISA, Imunoblot, trichinellosis, serodiagnosis, 43 kDa glycoprotein, synthetic peptides, poly-L-lysine, Immunoblot

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 15. 5. 2017

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 7. 6. 2017
• Vedoucí: RNDr. Martin Kašný, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Analytická biochemie