Využití PCR metod při stanovení alergií na lepek.

Bc. Nikola Königová

Master's thesis

The Use of PCR Methods for the Determination of Gluten Allergy.

Abstract:

Tato práce se zabývá problematikou laboratorní diagnostiky celiakie, geneticky podmíně-ného autoimunitního onemocnění, které vzniká abnormální reakcí na lepek v potravě. Od-hadovaná prevalence celiakie je v Evropě a USA 1:100, v ČR 1:200-250, přičemž se častěji vyskytuje u žen než u mužů v poměru zhruba 2:1. Přestože literatura uvádí, že tímto onemocněním trpí až 1 % populace, mnozí z postižených si toho nejsou vědomi. Genetická predispozice k celiakii je spojena s antigeny tkáňové slučitelnosti, které jsou označovány jako HLA (z angl. Human Leukocyte Antigens). Asi 90-95 % pacientů s celiakií jsou nosi-teli heterodimeru HLA-DQ2, který je kódovaný alelami HLA- DQA1*05 a DQB1*02 a/nebo heterodimeru DQ8 kódovaného alelou DQB1*03:02 zpravidla v kombinaci DQA1*03 variantou. Molekulárně-genetická typizace těchto HLA znaků se proto u celiakie využívá jako genetický test s vysokou negativní prediktivní hodnotou. Praktická část této práce porovnává vybrané metody k vyšetření HLA znaků u celiakie, které využívají polymerázovou řetězovou reakci, a souborně zpracovává výsledky vyšetření provedených v laboratořích Ústavu imunologie Fakultní nemocnice Olomouc.

Abstract:

This work deals with the laboratory diagnosis of celiac disease, a genetically conditioned autoimmune disease with an estimated prevalence in Europe and USA 1:100 and in Czech republic 1:200-250, female : male ratio of approximately 2:1. Literature indicates that this disease affects as many as 1 % of the population, while many of the disability are often not even aware of. Genetic predisposition to celiac disease is associated with tissue compatibi-lity antigens which are referred to as HLA (from English. Human Leukocyte Antigens). About 90-95 % of patients with celiac carry heterodimers DQ2 or DQ5, encoded by DQA1*05 and DQB1*02 alleles both in cis or in trans configuration, and DQ8 molecules, encoded by DQB1*3:02 generally in combination with DQA1*03 variant. HLA molecular typing of celiac disease is essentially a genetic test with a negative predictive value. The practical part of this work compares some methods for testing for celiac disease HLA cha-racters using polymerase chain reaction and comprehensively presents results of the tests carried out in the laboratories of the Institute of Immunology University Hospital Olo-mouc.

Keywords

celiakie, HLA-DQA1, HLA-DQB1, HLA typizace, PCR-SSP, obilné bílkoviny, lepek

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 25. 4. 2014

Accessible from:: 25. 4. 2014

Thesis defence

Tomas Bata University in Zlín

Faculty of Technology

Master programme / field:
Chemistry and Food Technologies / Technology, Hygiene and Economics of Food Production