Izolace thylakoidních buněčných membrán

Lenka KUCHAŘOVÁ

Bakalářská práce

Isolation of thylakoid mebrane from conifer species

Anotace:

Cílem této práce bylo zpracovat literární rešerši k tématu izolace thylakoidních membrán a přehled používaných elektroforetických technik pro separaci pigment-proteinových komplexů thylakoidních buněčných membrán jehličnanů. V experimentální části se věnuji úpravě metodiky izolace thylakoidních membrán, aby mohly být použity pro elektroforetickou separaci. Stav thylakoidních membrán byl posuzován podle parametru FV/FM. Ideální postup pro izolaci thylakoidních membrán byla určena homogenizace při 15 400 ot./min. (s dispergačním nástavcem S25N-25G) po dobu 30 sekund v 50 mililitrech homogenizačního média a navážce čtyř gramů jehlic. V konečné suspenzi izolovaných thylakoidních membrán bylo dosaženo nejvyšší hodnoty FV/FM 0,778. Nejvyšší naměřená hodnota chlorofylů ve vzorku byla 589 ?g/ml.

Abstract:

The aim the thesis was to conclude a literature review on isolation of thylakoid membranes from conifer species and the review of electrophoretic techniques being used for the separation of thylakoid pigment-protein complexes. As the experimental part of the thesis I try to establish and optimize the methodology for isolation of thylakoid membranes in order to enable the use of the membranes for electrophoretic separation of protein complexes. Quality of the izolated thylakoid membranes was assessed by the fluorescence parameter FV/FM. As a result of the thesis the homogenization at 15 400 rpm (with a dispersing nozzle S25N-25G) for 30 seconds in 50 ml of homogenization medium and input of four grams of needles was determined as an ideal process for isolation of thylakoid membranes. The final suspension of isolated thylakoid membranes achieved the highest value of FV / FM 0.778. The highest value of chlorophyll measured in the sample was 589 micrograms /ml.

Klíčová slova

izolace thylakoidních membrán, parametr fluorescence FV/FM, CN-PAGE, jehličnany

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 22. 4. 2013

Zveřejnit od: 22. 4. 2013

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 21. 5. 2013
• Vedoucí: Mgr. Irena Kurasová, Ph.D.

OSTRAVSKÁ UNIVERZITA V OSTRAVĚ

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biologie / Experimentální biologie