Elektrochemické stanovení kinetických parametrů solubilní a imobilizované proteinkinázy A

Bc. Kristina Malíková

Diplomová práce

Electrochemical Determination of Kinetic Parameters of Soluble and Immobilized Protein Kinase A

Anotace:

Cílem teoretické části diplomové práce bylo popsat proteinkinázu A, metody imobilizace enzymů a elektroanalytické metody stanovení aktivity proteinkinázy A. V praktické části jsem se zabývala imobilizací proteinkinázy A na vybrané magnetické částice. Dále byla práce zaměřena na elektrochemické stanovení její enzymové aktivity pomocí nízkomolekulárního substrátu Biotin-Kemptide v přítomnosti adenosin thiotrifosfátu (ATP-S) a porovnání se solubilní formou enzymu. Dále stanovení kinetických parametrů solubilní a imobilizované proteinkinázy A. Metoda stanovení je založena na detekci zlatých nanočástic square-wave voltametrií.

Abstract:

The aim of the theoretical part of the master thesis was to describe protein kinase A, methods of enzyme immobilization and electroanalytical methods for determination of protein kinase A activity. In the practical part I focused on the immobilization of protein kinase A on selected magnetic particles. Furthermore, the work focused on the electrochemical determination of its enzyme activity using the low molecular weight substrate Biotin-Kemptide in the presence of adenosine thiotriphosphate (ATP-S) and comparison with the soluble form of the enzyme. In addition, determination of kinetic parameters of solubilized and immobilized protein kinase A. The method of determination is based on the detection of gold nanoparticles by square-wave voltammetry.

Klíčová slova

proteinkináza A, enzymová aktivita, imobilizace, magnetické částice, kinetické parametry enzymové reakce

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 10. 5. 2024

Zveřejnit od: 31. 12. 2999

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: doc. RNDr. Lucie Korecká, Ph.D.

Univerzita Pardubice

Fakulta chemicko-technologická

Magisterský studijní program / obor:
Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví / Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví