<p>Analýza funkce karbonické anhydrázy IX pomocí jednodoménových protilátek</p>

Bc. Bianka Nováková

Diplomová práce

<p>Analysis of carbonic anhydrase IX function using single-domain antibodies</p>

Anotace:

Karbonická anhydráza IX (CA IX) je hypoxií indukovaný transmembránový enzym, který se podílí na progresi nádorů a nepříznivé prognóze u různých typů rakoviny, včetně melanomu. Díky své selektivní expresi v hypoxických oblastech nádorů před-stavuje perspektivní cíl pro diagnostické a terapeutické účely. Jednodoménové proti-látky (SdAbs) jsou unikátní funkční protilátky odvozené od protilátek velbloudovi-tých, skládající se pouze z jedné variabilní domény těžkého řetězce. Ve srovnání s konvenčními protilátkami si zachovávají srovnatelnou afinitu k antigenu, přičemž vykazují vyšší rozpustnost a menší molekulovou hmotnost. Z těchto důvodů jsou po-važovány za slibné alternativy monoklonálních protilátek. V této diplomové práci byla analyzována možnost detekce a cílení na CA IX v buňkách melanomu pomocí SdAbs. Validace vazebné schopnosti a funkčnosti SdAbs byla provedena metodami průtokové cytometrie a imunofluorescenčního barvení. Výsledky této práce podpo-rují potenciál SdAbs v detekci CA IX v melanomu a poskytují základ pro využití SdAbs v onkologickém výzkumu a diagnostice.

Abstract:

Carbonic anhydrase IX (CA IX) is a hypoxia-induced transmembrane enzyme in-volved in tumour progression and poor prognosis across various cancers, including melanoma. Given its selective expression in hypoxic tumour regions, CA IX presents a promising target for diagnostic and therapeutic strategies. Single domain antibodies (SdAbs) are unique, camelid-derived functional heavy chain antibodies. SdAbs are antibody fragments consisting of only one single-variable heavy-chain domain. In comparison with conventional antibodies, they possess a similar antigen binding affinity but a higher solubility. Moreover, SdAbs have a small molecular weight and are considered promising agents and alternatives to monoclonal antibodies. In this thesis, the possibility of detecting and targeting CA IX in melanoma cells using SdAbs was analysed. Their binding and functionality were validated using flow cytometry and immunofluorescence techniques. The study highlights the utility of SdAbs for detecting CA IX in melanoma and lays the groundwork for further development of SdAb-based tools in cancer research and diagnostics.

Keywords

karbonická anhydráza IX, jednodoménové protilátky, melanom, průtoková cytometrie, imunofluorescence, carbonic anhydrase IX, single-domain antibodies, melanoma, flow cytometry, immunofluorescence

Jazyk práce: angličtina

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 15. 5. 2025

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 17. 6. 2025
• Vedoucí: Mgr. Bc. Stjepan Uldrijan, CSc.
• Oponent: Mgr. Lukáš Moráň, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví - Bioanalytik / Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví - Bioanalytik