Využití moderních metod ke stanovení nízkomolekulárních látek

Bc. Veronika Křešťáková

Diplomová práce

Use of modern methods for the determination of low-molecular compounds

Anotace:

Bachor je nejobjemnější a metabolicky nejdůležitější část trávicí soustavy přežvýkavců, protože zde probíhá celá řada klíčových metabolických procesů důležitých pro efektivní využití potravy. Všechny tyto procesy jsou především závislé na jeho mikrobiálním složení, které zahrnuje prvoky, houby a bakterie, včetně archea. Dochází zde především k metabolismu sacharidů, které jsou hlavními zdroji energie pro přežvýkavce. A také zde probíhá celá řada minoritních metabolických procesů, mezi které se řadí i metabolismus isoflavonů. Cílem této práce byla optimalizace a validace metody pro stanovení těkavých mastných kyselin (TMK) pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Dále pak byl sledován vliv vybraných mykotoxinů na množství TMK v bachorové tekutině. V rámci této práce bylo zjištěno, že mykotoxiny enniatin B a B1 měly statisticky významný vliv (p<0,05) na množství TMK, jejichž zvýšená či snížená koncentrace má vliv na změnu pH bachoru. Tato změna pH ovlivňuje množství a druhy mikroorganismů, které jsou v bachorové tekutině obsaženy. Druhá část diplomové práce byla zaměřena na zavedení, optimalizaci a validaci metody pro stanovení isoflavonů v mléku pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s hmotnostní detekcí. Pomocí této metody byl sledován vliv přídavku jetelového extraktu do krmiva na množství isoflavonů v mléce dojnic. Na základě těchto měření bylo zjištěno, že došlo ke statisticky významnému (p<0,05) nárůstu v obsahu množství genisteinu, biochaninu A, equolu a daidzeinu, u dojnic krmených jetelovým extraktem. Mléko obsahující zvýšenou hladinu námi sledovaných isoflavonů by mohlo být využito při prevenci civilizačních chorob.

Abstract:

The rumen is the most voluminous and metabolically crucial part of the ruminants’ digestive system because several metabolic processes involved in feed digestion take place there. All these processes depend heavily on the rumen´s microbial composition, which includes protozoa, fungi, bacteria and archaea. The primary purpose of the rumen is metabolization of carbohydrates, which serve as the main source of energy for all ruminants. Furthermore, there are also lots of minor metabolic pathways, such as the metabolism of isoflavones. The aim of this work was to optimize and validate the method for the determination of volatile fatty acids by using high performance liquid chromatography. Furthermore, the study was conducted on the effect of selected mycotoxins on the amount of volatile fatty acids in the rumen fluid. In this work, it was found that the mycotoxins enniatin B and B1 have a statistically significant effect (p<0.05) on the quantity of volatile fatty acids, whose increased or decreased concentration affects the rumen’s pH levels. The pH change influences the types and amounts of microorganisms present in the rumen fluid. The second part of the thesis was focused on the introduction, optimization, and validation of a method for the determination of isoflavones in milk using high performance liquid chromatography with mass detection. This method was used to study the effects of clover extract in the feed on the amount of isoflavones in dairy cow milk. Based on these measurements, it was found that dairy cows fed with feed clover extract had a statistically significant (p<0.05) increase in the content of genistein, biochanin A, equol, and daidzein. Milk containing elevated levels of the isoflavones could be used to prevent civilization diseases.

Klíčová slova

bachor, těkavé mastné kyseliny, mykotoxiny, isoflavony, HPLC, MS

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 16. 6. 2020

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 30. 6. 2020
• Vedoucí: doc. Mgr. Tomáš Kašparovský, Ph.D.
• Oponent: Mgr. Vojtěch Sedláček, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie