Cytokininové nukleotidy a jejich izolace z rostlinných pletiv

Bc. Lucie HALENKOVÁ

Bakalářská práce

Cytokinin nucleotides and their isolation from plant tissues

Anotace:

Tato bakalářská práce je zaměřena na vypracování purifikačního protokolu s použitím extrakce na pevné fázi pro separaci cytokininových nukleotidů od sacharidů. Teoretická část je věnována cytokininům, jejich biologické aktivitě a metabolismu, dále pak separační metodě extrakce na pevné fázi, metodám analýzy cytokininů se zaměřením na kapalinovou chromatografii a kapilární elektroforézu. V experimentální části je popsána purifikace pomocí extrakce na pevné fázi s použitím sorbentu diethylaminoethyl Sephadexu a elučního činidla 1M mravenčanu amonného. Ze získaných výsledků vyplývá, že zvolený purifikační krok je vhodný pro separaci cytokininových nukleotidů od sacharosy. Zatímco je takto sacharid kvantitativně odstraněn, návratnost nukleotidů se pohybuje kolem 80%. Použití 6% roztoku kyseliny mravenčí jako elučního činidla není vhodné, protože jeho eluční síla je nedostatečná.

Abstract:

This bachelor thesis is focused on the development of the purification protocol using solid phase extraction for separation of cytokinin nucleotides from carbohydrates. The theoretical part is devoted to cytokinins, their biological activity and metabolism, as well as a separation methods, solid phase extraction, methods of final analysis with emphasis on liquid chromatography and capillary electrophoresis. The experimental part describes the cytokinin nucleotide purification by solid phase extraction using a sorbent diethylaminoethyl Sephadex and 1M ammonium formate as a eluent. The results show that the selected purification step is suitable for separation cytokinin nucleotides from sucrose. While sugars are removed quantitatively, a recovery of nucleotides is about 80%. Using 6% formic acid as the eluent is not suitable due to its low elution strength.

Klíčová slova

cytokininy, metabolismus cytokininů, extrakce na pevné fázi, kapalinová chromatografie, kapilární elektroforéza

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 19. 8. 2013

Zveřejnit od: 19. 8. 2013

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 2. 9. 2013
• Vedoucí: Doc. RNDr. Petr Tarkowski, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie