Studium vlastností a funkce S-nitrosoglutathionreduktasy u Solanum spp.

Bc. Petra ŠAŘECOVÁ

Diplomová práce

Study of features and function of S-nitrosoglutathion reductase in Solanum spp.

Anotace:

Oxid dusnatý je endogenně produkovaný radikál, který vykonává signální funkci u všech vyšších organismů. S-nitrosylace, která vzniká kovalentním vazbou NO na cysteinová rezidua, je klíčovou posttranslační modifikací u živočichů a i u rostlin, kde může mít velmi důležité signální a regulační funkce. Tato práce shrnuje poznatky o S-nitrosothiolech zejména S-nitrosoglutathionu a také enzymu S-nitrosoglutathionreduktase (GSNOR). GSNOR je důležitý pro detoxifikaci formaldehydu a také reguluje hladinu S-nitrosothiolů v rostlinách. V experimentální části byla provedena purifikace rekombinantního enzymu GSNOR ze Solanum lycopersicon cv. Amateur exprimovaného v E.coli a detekce GSNOR aktivity na polyakrylamidovém gelu. Tato práce popisuje stanovení aktivity GSNOR v kořenech a hypokotylech rajčete jedlého a hrachu setého, stanovení aktivity GSNOR v mitochondriích a chloroplastech. Na závěr, práce obsahuje stanovení změny aktivity GSNOR u tří genotypů rajčete vlivem infekce patogenem.

Abstract:

Nitric oxide is a short-live, endogenously produced radical that acts as a signaling molecule in all higher organism. S- nitrosylation, the covalent attachment of nitric oxide to a cysteine thiol, is now established as a key post-translational modification in animals and now is suggests that this modification may also have a central fuction in plant biology. This work summarizes the knowledge about S-nitrosothiols, especially S-nitrosoglutathion GSNO and also describes enzyme S-nitrosoglutathion reductase (GSNOR). This enzyme is important in the detoxification of formaldehyde and also controlling GSNO and S-nitrosothiol levels in plants. In experimental part of this work has included purification of recombinant GSNOR from Solanum lycopersiccon cv. Amateur expressed in E. coli and detection of GSNOR acticity on polyacrylamid gel. This work also describes determination of GSNOR activity of roots and hypocotyls of Solanum lycopersicon and Pisum sativum, determination of GSNOR activity in mitochondrions and chloroplasts. In conclusion, this work has included determination of change of GSNOR activity in three genotypes of Solanum by infection pathogen.

Klíčová slova

Abiotický stres, biotický stres, hrách (Pisum sativum), oxid dusnatý, rajče (Solanum lycopersicon), S-nitrosylace, S-nitrosoglutathionreduktasa

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 26. 4. 2011

Identifikátor: 110965

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Mgr. Marek Petřivalský, Dr.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie