Dvoukanálový enzymový biosensor pro metabolity ve slinách

Bc. Martin Pihar

Diplomová práce

Dual-channel enzyme biosensor for salivary metobolites

Anotace:

Tato diplomová práce se zabývá neinvazivním stanovením glukosy a laktátu ve slinách. Za tímto účelem byly sestrojeny dvoukanálové biosensory s imobilizovanými enzymy glukosaoxidasou a laktátoxidasou. Při měření byla použita metoda amperometrie. Pro snadné nanášení vzorku byla dvěma různými metodami 3D tisku vytvořena průtočná cela. Teoretická část se zabývá charakteristikou biosensorů, použitými enzymy, metodami 3D tisku a poznatky o analýze slin. V praktické části je popsána výroba průtočné cely, imobilizace enzymů a tvorba kalibračních závislostí. Na závěr je popsáno měření s reálnými vzorky, při kterém se projevily nedostatky v postupu práce s biologickými materiálem. Stanovené koncentrace glukosy a laktátu byly ve většině případů nižší než hodnoty zmiňované v odborné literatuře.

Abstract:

This thesis deals with non-invasive determination of glucose and lactate in saliva. For this purpose dual-channel biosensors with immobilized enzymes glucose oxidase and lactate oxidase were constructed. Chronoamperometry was used as measuring method. In order to easily add samples, two different methods of 3D printing were used to create a flow-through cell. Theoretical part is focused on biosensors characteristics, used enzymes, 3D printing methods and salivary diagnostics The experimental part describes production of the flow-through cell, enzyme immobilization and obtaining the calibration curves. Finally experiments with real saliva samples were carried out. During these experiments imperfections in biological samples handling became evident. Most of the determined concentrations of glucose and lactate in saliva were lower compared to literature.

Klíčová slova

glukosaoxidasa, laktátoxidasa, glukosa, laktát, 3D tisk, analýza slin, stereolitografie, fused deposition modelling, aditivní výroba, glucose oxidase, lactate oxidase, glucose, lactate, 3D printing, salivary diagnostics, stereolitography, additive manufacturing

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 13. 5. 2019

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 3. 6. 2019
• Vedoucí: doc. RNDr. Petr Skládal, CSc.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Analytická biochemie