Funkce 14-3-3zeta proteinu při vázání nefosforylovaných proteinových ligandů

Bc. Gabriel Zvonček

Bakalářská práce

Role of 14-3-3zeta protein in the binding of nonphosphorylated protein ligands.

Anotace:

Rodina 14-3-3 je perspektivní rodina proteinů, které vystupují v mnoha důležitých biologických procesech jako například regulace bunečného cyklu, apoptóza, neurochemii mozku, regulace proteinu a v bunečné signalizaci. Objevuje se nová hypotéza ve vázání partnerů 14-3-3 pomoci úseku, který slouží jako kotvy a vážou se na 14-3-3 mimo fosforylačního vazebního místa. K otestováni této hypotézy byla připravena verze 14-3-3, která má odstraněné fosforylační vazební místo. Prezentovaná bakalářská práce popisuje návrh mutací, jejich zavedení a purifikaci 14-3-3δ mutantu. Na závěr, byla použita 31P NMR pro potvrzení ztráty schopnosti tohoto mutantu vázat fosforylovaný peptid tyrozín hydroxylázy, který se váže na 14-3-3δ WT.

Abstract:

Family of 14-3-3 are perspective proteins that take part in many important biological functions such as regulation of cell cycle, apoptosis, neurochemistry of brain, regulation of proteins and cell signaling. New hypothesis in binding mechanism of 14-3-3 partners emerged about “anchor” like segments that interact with regions outside of the 14-3-3 phosphorylation binding sites. In order to test this hypothesis we have constructed the 14-3-3 that has removed phosphorylation binding site. The presented bachelor thesis describes the design of such mutation, their incorporation and the purification of such 14-3-3δ mutant. Finally, 31P NMR was utilized for proving that the mutant lost completely the ability to bind phosphorylated peptide of tyrosine hydroxylase that binds to the 14-3-3δ WT.

Keywords

14-3-3, NMR, fosforylace, phosphorylation

Jazyk práce: angličtina

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 19. 5. 2014

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 17. 6. 2014
• Vedoucí: RNDr. Mgr. Jozef Hritz, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie