Biosensory využívající luminiscenční detekci

Bc. Daniela Popovská

Bakalářská práce

Biosensors with luminiscent detection

Anotace:

Tato práce se zabývá praktickou realizací luminiscenčních biosenzorů. Cílem je prozkoumat jednoduché možnosti sledování chemiluminiscenční reakce pomocí fotodiody za použití modelového páru protilátka – antigen. V první části bakalářské práce je popsán princip biosenzorů. Biosenzory jsou kombinací biorekogniční molekuly a vhodného převodníku, tato kombinace umožňuje převést (bio)chemickou informaci na elektrický signál, který lze snadno měřit, a proto jsou stále více využívány ke stanovení různých látek. Jsou zde definovány optické a luminiscenční biosenzory, imunosenzory a protilátky. Hlavní část práce obsahuje navržený systém pro měření luminiscence. Jedná se o měřící celu, ve které je umístěna imobilizovaná protilátka, v imunochemické reakci se naváže konjugát antigenu s peroxidasou a nakonec se po promytí stanoví množství zachycené peroxidasy. Přes celu protéká luminol ve směsi s peroxidem vodíku a enzymově generovaná luminiscence je snímána pomocí fotodiody. Signál je vyhodnocen v počítačovém programu Labtools. Jsou uvedeny první výsledky měření s navrženou měřící konfigurací.

Abstract:

This bachelor thesis deals with the practical implemantation of luminiscent biosensors. The purpose is evaluation of a simple method and set-up of monitoring chemiluminescent reacion by the help of a photodiode and using the model pair of antibody – antigen. The principle of biosensors is described in the first part of the thesis. Biosensors consist of biorecognition elements in close contact with a suitable transducer. This combination makes possible transformation of the (bio)chemical information into electrical signal, witch can be easily measured. Biosensors are increasingly used for the determination of various substances. In the introduction, optical and luminiscent biosensors are defined, as well as principles of immunosensors and antibodies. The main part of the thesis describes the designed system for measurement of luminiscence. It is the flow-through cell with beads containing the immobilized antibody. The reaction inside the cell is catalysed by peroxidase, which is bound as a label in the form of immunocomplex. Next, the mixture of luminol and hydrogen peroxide is injected and the enzyme-catalyzed luminiscence is scanned by the use of photodiode. The signal is analysed in the computer program Labtools. The initial results obtained with the developed experimental configuration are mentioned.

Klíčová slova

Biosenzor, luminiscence, fotodioda, protilátka, luminol, biosensor, photodiode, antibody

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 14. 5. 2009

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 16. 6. 2009
• Vedoucí: doc. RNDr. Petr Skládal, CSc.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie