Charakterizace vazby myeloperoxidasy na erytrocyty

Bc. Silvie Gajdová, Ph.D.

Master's thesis

Characterisation of myeloperoxidase binding to erythrocytes

Anotácia:

Myeloperoxidasa (MPO) je nejabundantnější enzym v granulích neutrofilních granulocytů uvolňovaný po jejich aktivaci během degranulace. Jeho funkce byla primárně spojována s obranou hostitele. Nynější studie však ukazují, že MPO je úzce zapojena v regulaci buněčné homeostázy a může hrát významnou roli v iniciaci a propagaci akutních i chronických cévních zánětlivých onemocnění. MPO se váže na cévní endotel, kde se ukládá a ovlivňuje fyziologii těchto buněk. Byla také popsána vazba MPO na povrch krevních fagocytů. Avšak vazba MPO na erytrocyty nebyla zatím popsána. Tato diplomová práce se zabývá charakterizací vazby MPO na lidské a myší erytrocyty. Podařilo se prokázat vazbu MPO na povrch erytrocytů různými metodami. Elektrostatický charakter vazby MPO k povrchu erytrocytu byl prokázán rozrušením této vazby pomocí nadbytku negativně nabitého glykosaminoglykanu heparinu v buněčné suspenzi. Získaná data také ukazují vliv MPO na sedimentaci erytrocytů, kdy erytrocyty inkubované s MPO sedimentovaly rychleji než neovlivněné erytrocyty. Na základě těchto výsledků lze předpokládat, že MPO navázána na erytrocytech může hrát významnou roli v cirkulaci erytrocytů v cévách, zejména pak v kapilárách.

Abstract:

Myeloperoxidase (MPO) is the most abundant enzyme in granules of neutrophil granulocytes that is released upon their activation during degranulation process. MPO has long been viewed to function primarily as a bactericidal enzyme centrally linked to innate host defense. Current studies suggest that MPO is profoundly involved in the regulation of cellular homeostasis and may play a central role in initiation and propagation of acute and chronic vascular inflammatory diseases. MPO binds to vascular endothelium, it is stored here and affects physiology of these cells. The binding of MPO to phagocytes surface was also defined. But MPO binding to erythrocytes hasn’t been described. This diploma thesis is focused on the characterization of MPO binding to human and mice erythrocytes. It was possible to prove the MPO binding to erythrocytes surface with different methods. Electrostatic interaction between MPO and erythrocytes surface was suggested from data showing an elimination of this bond with an excess of negative charge glycosaminoglycan heparin in the cells suspension. Finally, obtained data also show influence of MPO interaction with erythrocyte surface on erythrocytes sedimentation. Sedimentation of erythrocytes with MPO was faster than unaffected erythrocytes. Overall, it can be assumed that MPO on the erythrocyte’s surface may play significant role in erythrocytes circulation in vessels, especially in the capillaries.

Kľúčové slová

Myeloperoxidasa, erytrocyty, endoteliální buňky, zánět, myeloperoxidase, erythrocytes, endothelial cells, inflammation

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 10. 5. 2012

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 4. 6. 2012
• Vedúci: doc. Mgr. Lukáš Kubala, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / odbor:
Biochemistry / Analytical Biochemistry