Optimalizace stanovení 3-hydroxymáselné kyseliny v biologickém materiálu odebraném při pitvě

Denisa PTÁČKOVÁ

Bachelor's thesis

Optimalization of determination 3-hydroxybutyric acid in biological material removed at autopsy

Abstract:

Beta-hydroxymáselná kyselina je látka patřící mezi ketolátky, které při zvýšené koncentraci v těle mohou způsobit metabolickou acidózu. Tato bakalářská práce se zabývá problematikou úmrtí způsobenými ketoacidózou. Mezi nejčastější příčiny se řadí diabetická či alkoholová ketoacidóza. Méně časté jsou poté příčiny úmrtí způsobené hypotermií či hladověním. Teoretická část této práce je věnována těmto patologickým stavům a jejich patofyziologiím. Dále se práce zaobírá problematikou kapalinové a plynové chromatografie s využitím hmotnostního spektrometru jako detektoru. V rámci experimentální části byla metoda stanovení beta-hydroxymáselné kyseliny optimalizována a validována pro analýzu plynovou i kapalinovou chromatografií. Pro obě metody byla, v rámci validace, zhotovena linearita metody, preciznost, a nejistota měření. Z výsledků bylo zjištěno, že jako vhodnější metoda pro rutinní analýzu se jeví chromatografie kapalinová s hmotnostní analýzou. Tato metoda byla následně použita při stanovení pacientských vzorků.

Abstract:

Beta-hydroxybutyric acid is substance that belongs to ketone bodies, which can in higher concentrations in body cause metabolic acidosis. This bachelor thesis is dealing with deaths caused by ketoacidosis. The main cause of deaths is diabetic or alcoholic ketoacidosis. Less frequent causes are hypothermia and starvation. The theoretical part of this thesis is dedicated to these pathological states and their pathophysiology. Furthermore, this work deals with the issues of liquid and gas chromatography using mass spectrometer as detector. In experimental part was the method of determination beta-hydroxybutyric acid optimized and validated for gas and liquid chromatography. For both methods, the linearity of the method, precision, and measurement uncertainty were performed within the validation. From the results it was found that liquid chromatography with mass analysis seems to be more suitable method for routine analysis. This method was subsequently tested for the determination of patient's samples.

Keywords

Ketolátky, beta-hydroxymáselná kyselina, diabetes mellitus, kapalinová chromatografie, plynová chromatografie, hmotnostní spektrometrie

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 30. 4. 2021

Accessible from:: 31. 12. 2999

Thesis defence

• Date of defence: 9. 6. 2021
• Supervisor: RNDr. Marie Staňková, Ph.D.

University of Ostrava

Faculty of Medicine

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Health Laboratory Assistant