Studium vazebných vlastností lektinů pomocí aglutinace buněk

Bc. Iveta Bačová

Bakalářská práce

Study of lectin binding properties using cell agglutination

Anotace:

Lektiny jsou proteiny, které specificky a reverzibilně vážou sacharidy a jsou schopny aglutinace buněk. Mají významnou úlohu v adhezivních a rozpoznávacích procesech. Jedná se o proteiny bez enzymové aktivity a všudypřítomné v přírodě. Cílem této práce je testování metody pro detekci zkoumaných mannosa-specifických lektinů s využitím kvasinek, které mají na svém povrchu mannosylované struktury. Smícháním lektinu s roztokem kvasinek vznikají aglutináty, vznik aglutinátů však může být inhibován přidáním sacharidů specifických pro daný lektin. Tato inhibice lektinů může být využívána pro anti-adhezivní terapii, která zabraňuje lektinům a adhezivním proteinům patogenů přisedat na hostitelské tkáně. Dalším cílem práce je tedy vytvořit metodu, která dokáže poměrně jednoduše a přesně určit, jak je určitá látka schopna inhibovat lektin či adhezivní protein. Provedeným výzkumem byla zjištěna nejmenší možná koncentrace lektinu, optimální koncentrace kvasinek a také fakt, že aglutinaci lze pozorovat na cenově dostupném přenosném mikroskopu. Také je možné ověřit pomocí inhibice aglutinace schopnost rozmanitých sloučenin inhibovat lektin či adhezivní protein.

Abstract:

Lectins are proteins which specifically and reversibly bind saccharides and are capable of agglutination of cells. They have a major role in adhesive and identification processes. These are proteins without enzyme activity and they are ubiquitous in nature. The aim of this thesis is to test and verify the method used to detect mannose-specific lectins using yeasts, which have mannosylated structures on its surface. Mixing a lectin with the yeast solution creates agglutinates, agglutination can however be inhibited by addition of carbohydrates specific for given lectin. This inhibition of lectins can be used for anti-adhesive therapy, which prevents lectins and adhesive proteins of pathogens to preside at host’s tissue. Another aim is to develop method that can fairly easily and accurately determine how is certain substance capable of inhibiting a lectin or an adhesive protein. The research determined the lowest concentration of lectins and optimal yeast concentration and it was proved that agglutination is observable in low-cost portable microscope. It was also possible to verify ability of various compounds to inhibit a lectin or an adhesive protein by the inhibition of agglutination.

Klíčová slova

lektiny, aglutinace, kvasinky, flokulace, lektin BC2L-A, lectins, agglutination, yeast, flocculation, lectin BC2L-A

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 13. 5. 2015

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 8. 6. 2015
• Vedoucí: prof. RNDr. Michaela Wimmerová, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Aplikovaná biochemie / Aplikovaná biochemie