Optimalizace metody stanovení kyseliny močové

Bc. Markus Plančár

Bachelor's thesis

Optimalization of uric acid determination

Abstract:

Uric acid is an important analyte determined from human serum or plasma, which is thought to serve as an important antioxidant at physiological levels, along with vitamin C, which scavenges radicals causing oxidative stress. Conversely, at elevated levels, it can contribute to oxidative stress, exerting an inflammatory effect in the body, affecting joints, but also the circulatory and excretory system. One of the inflammatory diseases caused by uric acid is gout, which is a painful disease caused by the deposition of monosodium urate (MSU) crystals in the joints. In this bachelor thesis, we have tried various analytical methods to determine the concentration of uric acid from plasma using spectrophotometry and fluorimetry. Calibration dependencies were constructed for each method and the limits of quantification, limits of detection and linear ranges were determined. By comparing the values of uric acid concentration from human plasma samples determined by the tested analytical methods and the parameters mentioned above, the uricase method was selected as the most accurate method. It was then validated with satisfactory results.

Abstract:

Kyselina močová je důležitý analyt stanovovaný z lidského séra nebo plazmy, který při fyziologických hladinách pravděpodobně slouží jako důležitý antioxidant spolu s vitaminem C, který odstraňuje radikály způsobující oxidační stres. Naopak při zvýšených hladinách může přispívat k oxidačnímu stresu a působit v organismu zánětlivě, což se týká především kloubů, ale může postihovat taktéž oběhový a vylučovací systém. Jedním ze zánětlivých onemocnění způsobených kyselinou močovou je dna, což je bolestivé onemocnění způsobené ukládáním krystalů sodné soli kyseliny močové v kloubech. V bakalářské práci jsme vyzkoušeli různé analytické metody stanovení koncentrace kyseliny močové z plazmy pomocí spektrofotometrie a fluorimetrie. Pro každou metodu byla sestrojena kalibrační závislost a stanoveny mez stanovitelnosti, mez detekce a lineární rozsah. Na základě porovnání hodnot koncentrace kyseliny močové ze vzorků lidské plazmy stanovených testovanými analytickými metodami a daných parametrů byla vybrána urikázová metoda jakožto nejpřesnější. Následně byla provedena validace, která měla uspokojivé výsledky.

Kľúčové slová

kyselina močová, spektrofotometrie, analytické stanovení, urikáza, zánětlivá onemocnění, dna, uric acid, spectrophotometry, analytical determination, uricase enzyme, inflammatory diseases, gout

Jazyk práce: Slovak

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 16. 5. 2024

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 26. 6. 2024
• Vedúci: Mgr. Kateřina Dadáková, Ph.D.
• Oponent: Mgr. Bc. Lenka Jurasová

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biochemistry / Applied biochemistry