8-hydroxy-2-deoxyguanosin jako marker oxidačního poškození

Mgr. Petr Balík

Bachelor's thesis

8-hydroxy-2-deoxyguanosine as a oxidative damage marker

Abstract:

Oxidační poškození (stres) je stav, kdy dochází k porušení rovnováhy mezi účinkem volných radikálů a ochrannými mechanismy. Převaha tvorby volných radikálů způsobí oxidaci biologicky významných molekul a to ve svém důsledku vede k poškození tkání. Oxidační stres je jedním z důležitých faktorů, který se podílí na patogenezi řady onemocnění. V současné době je věnována stále větší pozornost možnostem jeho hodnocení. Míru oxidačního stresu je možno posoudit podle stanovení látek - markerů, které vznikají jako produkty reakce endogenních nebo exogenních látek s radikály. Mezi endogenní zdroje se řadí přirozené metabolické reakce jako je například produkce energie v mitochondriích. Z exogenních zdrojů to jsou kouření, polutanty, nadměrná spotřeba alkoholu, azbest, ionizující záření a infekce. Z markerů oxidačního poškození se často stanovují oxidační produkty DNA. Poškození DNA je převážně výsledkem reakce DNA s ROS (reactive oxygen species), nejčastěji s hydroxylovým radikálem (OHR). Jako biomarker oxidačního poškození DNA se nejčastěji stanovuje 8-hydroxy-2´-deoxyguanosin (8-OHdG). V této bakalářské práci byl podán přehled nových poznatků týkajících se metod stanovení 8-OHdG a jeho medicínských aspektů. Metody stanovení 8-OHdG jsou poměrně složité procesy zahrnující stanovení koncentrace pomocí HPLC s několika variantami detekce, kapilární elektroforézu a ELISA stanovení. V klinické diagnostice je z těchto metod nejvýznamnější ELISA. Další část bakalářské práce je věnována klinickému významu stanovení 8-OHdG u různých druhů nemocí. Jako zdroj informací byly vybírány převážně články týkající se humánní medicíny a články s medicínským aspektem.

Abstract:

Oxidative damage (stress) is caused by an imbalance between the production of free radicals and protective mechanisms. Excess formation of free radicals cause oxidation of biologically important molecules and consequently leads to tissue damage. Oxidative stress is one of the important factors that are involved in the pathogenesis of a number of diseases. At present, the increasing attention paid to the possibility of its evaluation. Oxidative stress can be evaluated by the determination of substances - markers that arise as products of reaction of endogenous or exogenous substances with the radicals. The endogenous sources include natural metabolic reactions such as energy production in the mitochondria. From exogenous sources are smoking, pollutants, excess alcohol consumption, asbestos, ionizing radiation and infection. Among the markers of oxidative damage is often determined the DNA oxidation products. DNA damage is largely the result of reaction of DNA with ROS (reactive oxygen species), usually with hydroxyl radicals (OHR). As a biomarker of DNA oxidative damage is most frequently determined 8-hydroxy-2'-deoxyguanosin (8-OHdG). In this work was given an overview of new knowledge relating to methods of determining 8-OHdG and its medical aspects. Methods for determination of 8-OHdG are relatively complex processes involving the determination of concentration by HPLC with a few variations of detection, capillary electrophoresis, 32-P postlabelling and ELISA determination. In the clinical diagnostics ELISA is the most important method. Another part of work is devoted to determining the clinical significance of 8-OHdG in various kinds of diseases. As a source of information was mainly collected articles on human medicine and medical articles aspect.

Keywords

8-hydroxy-2´-deoxyguanosin, 8-OHdG, marker oxidačního poškození, oxidační stres, DNA poškození, stanovení, 8-hydroxy-2´-deoxyguanosine, marker of oxidative damage, oxidative stress, DNA damage, analysis

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 7. 5. 2009

Thesis defence

• Date of defence: 15. 6. 2009
• Supervisor: prof. RNDr. Eva Táborská, CSc.

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Biochemistry / Biochemistry