Analýza mastných kyselin v diglyceridech a triglyceridech tělních tekutin pomocí plynové chromatografie

Ivana SCHNEEDORFEROVÁ

Bakalářská práce

Analysis of Fatty Acids in Diacylglyceroles and Triacylglyceroles of Body Fluids by Gass Chromatography

Anotace:

Adrenalin je známý stresový hormon savců. Adipokinetický hormon (AKH) má stejnou funkci u hmyzu. AKH je peptidický hormon; jeden druh hmyzu může mít jeden nebo více typů AKH. V podstatě je AKH zodpovědný za uvolnění DGs z tukového tělesa. Naše pokusné zvíře {--} saranče (Locusta migratoria) je běžným modelovým organismem. Tento hmyz syntetizuje tři druhy AKH {--} AKH I, II a III. Ty se liší v aminokyselině peptidu, ale mají velmi podobný vliv na organismus. V poslední době používaná rutinní sulfovanilinová metoda k detekci nenasycených mastných kyselin (FA) podává pouze odhady o množství dvojných vazeb v mastných kyselinách. Námi navržená metoda, perspektivní GC/FID (plynová chromatografie s plamenovým ionizačním detektorem) je schopná určit jednotlivé druhy mastných kyselin a také jejich relativní poměr. Cílem této práce je nalézt vhodnou metodu přípravy vzorku pro techniku GC/FID a zkoumat vliv jednotlivých AKH na organismus sarančete a statisticky dokázat rozdíly ve vlivu AKH. Vzorek hemolymfy sarančete byl podroben extrakci podle Folcha a rutinní metodě SPE (extrakce na tuhou fázi). Další úpravou vzorku byla snadná a rychlá derivatizace methanoátem sodným následovaná měřením GC/FID. Druhová data byla zpracována PCA (analýzou hlavních komponent). Získali jsme přehledný grafický výstup potvrzující naší hypotézu a to, že každý druh AKH má různý vliv na složení FA v hemolymfě sarančete; AKH II má největší vliv.

Abstract:

Epinephrine is well known a stress hormone of mammals. The adipokinetic hormone (AKH) has the same function in insects. AKH is peptidic hormone; one species of insect possesses one or more types of AKH. Basically AKH is responsible for releasing of diacylglycerols (DGs) from fat body. Our experimental animal is common model organism, locust (Locusta migratoria). Those animal synthesizes three AKH types {--} AKH I, II and III. They differ in amino acid order in peptide, but having very similar influence on the organism. Recently used a routine sulfovaniline method for unsaturated fatty acids (FA) determination estimates only quantitatively the sum of double bounds in fatty acids. Our proposed method, perspective GC FID (Gas Chromatography with Flame Ionization Detector), is very revolutionary being able to determinate particular fatty acid species and also their relative ratio. Aim of this study is to find a proper sample preparation method for GC FID technique and to investigate the influence of particular AKH to the locust organism and to statistically prove the differences in AKH influences. A locust haemolymph was subjected by very usual sample extraction by Folch and a routine SPE (solid phase extraction) method. An easy and rapid derivatization by sodium methanolate was the next sample preparation step followed by GC FID measurement. Acquired data were computed by PCA (principal component analyses). We gained a well-arranged graphical output confirming our thesis that each AKH species has a different influence on FA composition in locust heamolymph; AKH II having the greatest influence.

Klíčová slova

derivatizace, extrakce na tuhou fázi (SPE), lipidy, mastné kyseliny, plynová chromatografie s plamenovým ionizačním detektorem (GC/FID)

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 7. 5. 2009

Zveřejnit od: 7. 5. 2009

Identifikátor: 13115

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 17. 6. 2009
• Vedoucí: RNDr. Aleš Tomčala

JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH

Zdravotně sociální fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biofyzika / Biofyzika a zdravotnická technika