Optimalizace růstu buněčné linie odvozené od nádoru vaječníku rezistentní na cisplatinu

Mgr. Eliška Stuchlíková

Bachelor's thesis

Optimization of the proliferation of cell line derived from ovarian cancer resistant to cisplatin

Anotácia:

Rakovina vaječníků je druhé nejčastější onkogynekologické onemocnění. Více než 70% případů je diagnostikováno ve III. a IV. stádiu, kdy je pěti-leté přežití pouze 20 – 30%. V současné době léčba onemocnění spočívá v chirugickém odstranění nádoru, radioterapii a chemoterapii. Při chemoterapii je využívána kombinace platinových derivátů (cisplatina, karboplatina, oxaliplatina) s paclitaxelem, na které však často vzniká rezistence. Přestože bylo publikováno několik studií zabývajících se rezistencí, mechanismus vzniku nebyl zcela objasněn. V první části experimentální práce byly optimalizovány procesy kultivace buněčných linií odvozených od nádorů vaječníků (SKOV-3, A2780 a A2780 cis). Jsou zde popsány proliferace buněk v čase a chování buněk při kultivaci v médiu bez přidaného fetálního bovinního séra. V druhé částí je popsáno odebírání, zpracování a analýza vzorků nádorového sekretomu na hmotnostním spektrometru TripleTOF 5600+. Ze získaných hmotnostně spektrometrických dat byly identifikovány proteiny sekretované buněčnými liniemi. Z těchto předběžných výsledků byly vybrány proteiny s alterujícími kvalitativními změnami. U buněčných linií rezistentních na cisplatinu (A2780 cis a SKOV-3) docházelo k sekreci proteinu beta-2-microglobulin (číslo proteinu P61769) a collagen alpha-1 XI (P12107), které nebyly nalezeny u buněčné linie senzitivní na cisplatinu (A2780). Dále pouze u linie A2780 cis byla pozorována sekrece následujících proteinů: insulin-like growth factor-binding protein 2 (P18065), stromelysin-1 (P08254 ), stathmin (P16949), destrin (P60981), peroxiredoxin-6 (P30041), gelsolin (P06396) a CD70 antigen (P32970). V této studii se bude dále pokračovat v rámci mojí diplomové práce.

Abstract:

Ovarian cancer is the second most common gynecological cancer. More than 70% of cases are diagnosed in III. and IV. stage, when the 5-year survival is only 20 – 30%. Currently the treatment is based on surgical removal of the tumor, radiotherapy and chemotherapy. Chemotherapy uses combination of platinum derivatives (cisplatin, carboplatin, oxaliplatin) with paclitaxel, in which often occurs drug resistance. Even though several studies focusing on cisplatin resistance were published, the mechanism of origin has not been fully clarified yet. In the first part of the experimental work processes of cultivation of ovarian cancer cell lines (SKOV-3, A2780 and A2780 cis) were optimized. The proliferation of cells and the acting of cells in fetal bovine serum-free medium are described. In the second part the collection, preparation and analysis of cancer secretome samples on the mass spectrometer TripleTOF 5600+ are described. From the acquired data secreted proteins were identified. From these preliminary results the proteins with qualitative changes were chosen. Cisplatin resistant cell lines (A2780 cis and SKOV-3) secreted proteins beta-2-microglobulin (protein number P61769) and collagen alpha-1 XI (P12107), which weren´t found at cisplatin sensitive cell line (A2780). Only cell line A2780 cis secreted these proteins: insulin-like growth factor-binding protein 2 (P18065), stromelysin-1 (P08254), stathmin (P16949), destrin (P60981), peroxiredoxin-6 (P30041), gelsolin (P06396) and CD70 antigen (P32970). I am going to continue with this study in my diploma thesis.

Kľúčové slová

rakovina vaječníků, rezistence, cisplatina, nádorová buňka, sekretované proteiny, proliferace, buněčná linie, A2780, A2780 cis, SKOV-3, ovarian cancer, resistance, cisplatin, cancer cell, secreted proteins, proliferation, cell lines

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 18. 5. 2015

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 19. 6. 2015
• Vedúci: prof. Ing. Lenka Hernychová, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biochemistry / Biochemistry