Příprava kardiomyocytů z embryonálních kmenových buněk

Bc. Štěpánka Jankovská

Diplomová práce

Differentiation of embryonic stem cells to cardiomyocytes

Anotace:

Kardiomyocyty lze získávat přípravou z embryonálních kmenových buněk. Během mé práce byly použity pouze myší embryonální kmenové buňky linie D3. Tyto buňky patří mezi pluripotentní kmenové buňky, pro něž je typická schopnost sebeobnovy a diferenciace do všech tří zárodečných listů. Embryonální kmenové buňky byly stimulovány v procesu diferenciace řadou chemických látek. Byl sledován vliv leukémii inhibujícího faktoru jako diferenciačního faktoru kardiomyogeneze. Leukémii inhibujícím faktorem je cytokin rodiny IL-6, která má společný gp 130 receptor. Buňky byly během své kultivace v přítomnosti či absenci leukémii inhibujícího faktoru (většinou v koncentraci 5 ng/ml) exponovány cizorodými látkami (jako peroxid vodíku, UO126- inhibitor Erk kinázy) a sledován byl jejich výsledný efekt na kardiomyogenezi. Jednu z hlavních rolí tu sehrála přítomnost či absence séra během kultivace. Western blottingem byly detekovány markery diferenciace z buněčných vzorků. Předpokládaný účinek leukémii inhibujícího faktoru jako významného diferenciačního faktoru na indukci kardiomyogeneze se nepotvrdil.

Abstract:

Cardiomyocytes can be obtained by preparation from embryonal stem cells. During my work I used only mouse embryonal stem cells of a cell-line D3. These cells belong to pluripotent stem cells of which a capability of self-renewal and ability to differentiate into all three embryonal layers is typical. During a process of differentiation embryonal stem cells were induced by a number of chemical substances. The influence of a leukemia inhibitory factor on a cardiomyogenesis was observed as a differentitation-inducing factor of cardiomyogenesis. The leukemia inhibitory factor is a member of the cytokine family IL-6, which share common gp130 receptor. During their cultivation in the presence or the absence of the leukemia inhibitory factor the cells were exposed to chosen foreign materials (such as hydrogen peroxide, UO126-inhibitor of Erk kinase) and their final influence on cardiomyogenesis was observed. The presence or absence of the serum was the main factor influencing the cultivation. The markers of differentiation were monitored by Western blotting from cell samples. The assumed role of LIF as a significant differentiation-inducing factor of cardiomyogenesis was not confirmed.

Klíčová slova

embryonální buňky (embryonal stem cells), kardiomyogeneze (cardiomyogenesis), kardiomyocyt (cardiomyocyte), leukémii inhibující faktor (leukemia inhibitory factor), gp130 receptor (gp130 receptor), JAK/STAT signální dráha (JAK/STAT signaling pathways)

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 15. 5. 2009

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 11. 6. 2009
• Vedoucí: Mgr. Jiří Pacherník, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biologie / Obecná biologie