Stanovení exprese antigenů na nádorových buňkách metodou multiparametrické flowcytometrie

MVDr. Jana Chovancová, Ph.D.

Doctoral thesis

Antigen expression on neoplastic cells using multiparametric flowcytometry approach

Abstract:

Průtoková cytometrie nachází uplatnění zejména v diagnostice a diferenciální diagnostice leukemií a lymfomů a řadí se mezi metody využívané k detekci minimální reziduální nemoci (MRD). Měření MRD umožňuje predikci účinnosti terapie a po jejím ukončení časný záchyt molekulárního relapsu. V této disertační práci je řešena problematika sledování MRD metodou průtokové cytometrie u pacientů s lymfomem z plášťových buněk (MCL). Na základě odlišné exprese vybraných antigenů na fyziologických a patologických B lymfocytech byl sestaven senzitivní osmibarevný protokol pro detekci MRD kombinující antigeny CD3/5/19/20/23/45/62L/200 a dosahující limitu detekce 0,02 %. Výsledky navrženého protokolu byly komparovány s metodou kvantitativní polymerázové řetězové reakce v reálném čase (RQ-PCR) ukazující silnou pozitivní korelací (rs=0,9; p<0,01). Navržený panel osmibarevné analýzy pro detekci hladin MRD u pacientů s MCL přispěje ke zkvalitnění monitorace odpovědi na léčbu a časné diagnostiky relapsů.

Abstract:

Flow cytometry is applied in diagnostics and differential diagnostics of leukemias and lymphomas and ranks among approaches which allow measurement of minimal residual disease (MRD). MRD detection is an essential tool for therapy response assessment and can identify molecular relapse of the disease. This work deals with MRD detection in mantle cell lymphoma (MCL) using the flow cytometry. Comparing expression of selected antigens on normal and pathologic B lymphocytes allowed to establish sensitive eight-color protocol combining antigens CD3/5/19/20/23/62L/200 and reaching the limit of detection of 0.02%. The results measured by this novel eight-color protocol was compared to RQ-PCR approach showing strong positive correlation (rs=0.9, p<0.01). The eight-color protocol for MRD detection in MCL will improve the therapy response assessment and the diagnostics of molecular relapses.

Keywords

Průtoková cytometrie, lymfom z plášťových buněk, minimální reziduální nemoc, imunofenotypizace, non-hodgkinské lymfomy, polymerázová řetězová reakce, flow cytometry, mantle cell lymphoma, minimal residual disease, immunophenotyping, non-Hodgkin lymphomas, polymerase chain reaction

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 7. 10. 2016

Thesis defence

• Date of defence: 10. 2. 2017
• Supervisor: prof. MUDr. Michael Doubek, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Medicine

Doctoral programme / field:
Oncology (4-years) / Oncology