Sledování účinnosti biodegradace textilních barviv Amesovým testem

Bc. Lenka HAVLÍKOVÁ

Master's thesis

Monitoring of the effectiveness of biodegradation of textile dyes by the Ames test

Abstract:

Diplomová práce je zaměřena na zhodnocení potenciální mutagenity dvou syntetických barviv: Methylene Blue a Reactive Orange 16. Tyto látky byly biodegradovány v rotačním diskovém bioreaktoru za pomoci houbové kultury Irpex lacteus až do úplného odbarvení vzorku. Vzorek Methylene Blue byl testován Amesovým testem jak před biodegradací (vstupní vzorek), během biodegradace (meziprodukt), tak i po proběhlé biodegradaci (výstupní vzorek). Naproti tomu u Reactive Orange 16 byl proveden Amesův test pouze před biodegradací a u konečných produktů biodegradace. Cílem bylo ověřit mutagenitu testovaných vzorků. Pro detekci posunových mutací byl v Amesově testu využit bakteriální kmen Salmonella typhimurium His- TA98 a pro detekci záměnových mutací kmen Salmonella typhimurium His- TA100. Test byl proveden jak s metabolickou aktivací in vitro jaterní mikrosomální frakcí S9 se směsí kofaktorů, tak i bez metabolické aktivace. Ke zhodnocení výsledků byl použit statistický software SALM. Vstupní vzorek Methylene Blue a meziprodukt byly potenciálně mutagenní v obou testech, tj. s aktivací i bez aktivace, zatímco konečný produkt biodegradace byl nemutagenní. Vstupní i konečný vzorek syntetického barviva Reactive Orange 16 byl detekován jako nemutagenní.

Abstract:

The thesis is aimed to evaluate potential mutagenicity of two synthetic dyes: Methylene Blue and Reactive Orange 16. These compounds were biodegraded in a rotating disk bioreactor using fungal culture Irpex lacteus until decolorization stopped. Sample of Methylene Blue was carried out by the Ames test before biodegradation (initial sample), in the course of biodegradation (degradation intermediate) and after biodegradation (end-product). However, Reactive Orange 16 was carried with the Ames test only before biodegradation and at the end-products of biodegradation. The aim was detection of mutagenicity of tested samples. In the Ames test were used for detection frameshift mutations Salmonella typhimurium His- strain TA98 and for detection confused mutations Salmonella typhimurium His- strain TA100. The test was performed both with metabolic activation in vitro using the S9 liver microsomal fraction with the cofactor mixture and without metabolic activation. The results were evaluated by statistical softwar SALM. Initial sample and intermediate of Methylene Blue were potentially mutagenic in both tests - with and without activation, while the end-products of biodegradation was non-mutagenic. Initial sample and end-products of synthetic dyes Reactive Orange 16 was detected as non-mutagenic.

Keywords

Mutagenita, Amesův test, Methylene Blue, Reactive Orange 16, bakteriální kmeny Salmonella typhimurium His- TA98, TA100, biodegradace.

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 22. 11. 2010

Accessible from:: 22. 11. 2010

Thesis defence

• Supervisor: Doc. RNDr. Kateřina Malachová, CSc.

University of Ostrava

Faculty of Science

Master programme / field:
Biology / Systematic Biology and Ecology