Senzitizace lidských embryonálních kmenových buněk k TRAILem indukované apoptóze poškozením DNA

Mgr. Lucie Pešková

Bachelor's thesis

Sensitization of human embryonic stem cells towards TRAIL-induced apoptosis by DNA damage

Abstract:

Apoptózu indukující ligand patřící do skupiny tumor nekrotizujícího faktoru –TRAIL – je transmembránový protein, který indukuje apoptózu u nádorově transformovaných buněk, ale nikoliv u normálních netransformovaných buněk. Působení TRAILu na různé nádorové buněčné linie je v současnosti intenzivně studováno a terapie kombinující TRAIL s běžně využívanými cytotoxickými látkami se momentálně nachází v první a druhé fázi klinických studií. Velmi málo je však známo o působení ligandu TRAIL na pluripotentní lidské embryonální kmenové buňky (hES buňky), které nejsou citlivé k apoptóze indukované ligandem TRAIL, ale již dříve bylo ukázáno, že k jeho působení mohou být senzitizovány inhibicí proteosyntézy. Cílem této bakalářské práce bylo zjistit, zda i poškození DNA způsobené cisplatinou hES buňky senzitizuje k TRAILem indukované apoptóze. V práci bylo zjištěno, že 1 a 2 μM cisplatina u hES buněk po 24hodinovém působení nezpůsobuje výraznou apoptózu, dochází však k poškození DNA a kumulaci buněk v S a G2 fázi. Vystavení hES buněk cisplatině v koncentracích 1 a 2 μM a následná aplikace ligandu TRAIL vedla k výraznému zvýšení indukce apoptózy.

Abstract:

Tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand – TRAIL – is a transmembrane protein inducing apoptosis in cancerously transformed cells, but not in normal non-transformed cells. Effects of TRAIL on different cancer cell lines are intensively studied and therapy combining TRAIL with common cytotoxic drugs is currently in phases I and II clinical studies. Nevertheless, a little is known about TRAIL effects on pluripotent human embryonic stem cells (hES cells), which are not sensitive towards TRAIL-induced apopotosis, but it has been previously described that they can be sensitized by inhibiting proteosynthesis. The aim of this bachelor thesis was to unravel whether also DNA damage caused by cisplatin sensitizes hES cells towards TRAIL-induced apoptosis. This bachelor thesis shows, that treatment with 1 and 2 μM cisplatin does not lead to apoptosis in hES cells, but causes DNA damage and cumulation of S and G2 cells. 1 and 2 μM cisplatin and TRAIL co-treatment of hES cells resulted in increased induction of apoptosis.

Keywords

lidské embryonální kmenové buňky, poškození DNA, cisplatina, apoptóza, TRAIL, human embryonic stem cells, DNA damage, cisplatin, apoptosis

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 14. 5. 2014

Thesis defence

• Date of defence: 17. 6. 2014
• Supervisor: doc. MVDr. Aleš Hampl, CSc.

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Biochemistry / Biochemistry