Validace metody přímé detekce cirkulujících nádorových buněk u pacientů s multiformním glioblastomem.

Bc. Pavel STEJSKAL

Diplomová práce

Validation of circulating tumor cells direct detection method in patients with glioblastoma multiforme.

Anotace:

Teoretická část diplomové práce se zabývá multiformním glioblastomem, nejagresivnějším subtypem maligních nádorů centrální nervové soustavy. Cirkulující nádorové buňky jsou buňky primárního tumoru uvolněné do periferní krve ve snaze opustit hypoxické a nekrotické prostředí tumoru. Jejich detekce je nepříznivým faktorem s potenciálem založení vzdálených metastáz, které se vyskytující častěji, než je obecně předpokládáno. Cílem praktické části diplomové práce je optimalizace stabilizace krevních vzorků a validace detekce cirkulujících nádorových buněk metodou přímé detekce systémem CytoTrack CT11TM. Z odběrových zkumavek CellSave, Streck a běžných zkumavek s obsahem solí kyseliny ethylendiamintetraoctové byla na základě analýzy viability buněk a DNA vybrána zkumavka Streck s nejdelší garancí stabilizace vzorku. Samotná platforma CytoTrack CT11TM byla validována nejdříve na buněčné linii U87-MG a poté využita k analýze pacientských vzorků s použitím markerů GFAP a vimentinu exprimovanými cirkulujícími nádorovými buňkami. U jednoho ze sedmi pacientských vzorků byl detekován klastr a samostatná cirkulující nádorová buňka.

Abstract:

The theoretical part of the diploma thesis deals with the glioblastoma multiforme disease, the most aggressive subtype of malignant tumors of the central nervous system. Circulating tumor cells are primary tumor cells released into the peripheral blood in an effort to leave the hypoxic and necrotic environment of the tumor. Their detection is an unfavorable factor with a potential to establish distant metastases that occur more frequently than it is generally thought. The aim of the experimental part of the diploma thesis is to optimize the stabilization of blood samples and to validate the method of direct detection of circulating tumor cells by the CytoTrack CT11TM system. Based on the cell viability and DNA stability analysis, The Streck tube with the longest guarantee of sample stabilization was selected from CellSave, Streck and conventional tubes containing ethylenediaminetetraacetic acid salts. The CytoTrack CT11TM platform was first validated on the U87-MG cell line and then used for analyses of the patient samples using GFAP and vimentin markers. A cluster and a single circulating tumor cell were detected in one of the seven patient samples.

Klíčová slova

Multiformní glioblastom, cirkulující nádorové buňky, gliální acidický fibrilární protein, vimentin, CytoTrack

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 11. 5. 2020

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: MUDr. Alona Řehulková

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie