Tkáňové vlivy asociované s genetickou stabilitou/nestabilitou kmenových/progenitorových buněk

Mgr. Veronika Pospíšilová, Ph.D.

Disertační práce

Tissue effects associated with genetic stability/instability of stem/progenitor cells

Anotace:

Lidské embryonální kmenové buňky (human Embryonic Stem Cells; hESC) jsou pluripotentní buňky mající vysoký potenciál pro biomedicínu jako zdroj diferencovaných buněk pro buněčnou terapii, in vitro modelování lidských onemocnění a pro vývoj a testování léčiv. Nicméně genomická nestabilita, jež bývá spojována s dlouhodobou kultivací hESC in vitro, je jednou z překážek bránících jejich klinickému využití. Ke genomické nestabilitě dochází v důsledku špatné segregace chromozomů v průběhu mitózy. Jedna z možných příčin je přítomnost abnormálního počtu centrozomů. Další nezbytnou úlohu má kontrolni bod dělícího vřeténka (Spindle Assembly Checkpoint; SAC), který působí jako kontrolní mechanismus správné segregace chromozomů během anafáze. V rámci této práce jsme sledovali jednak vliv nadpočetných centrozomů na buněčné dělení hESC, ale také na funkčnost SAC u těchto buněk. Dále jsme se zaměřili na přípravu DNA konstruktu pro značení centrozomů za účelem jejich vizualizace během buněčného dělení.

Abstract:

Human embryonic stem cells (hESCs) are pluripotent cells with a tangible potential for use in biomedicine. HESCs can be used as the source of differentiated cells for cell replacement therapies, tissue engineering and drug development. However, one of the obstacles preventing from clinical application of hESCs is that they are genomically unstable and acquire karyotypic abnormalities during propagation in vitro. Chromosomal instability arises from incorrect segregation of chromosomes during mitosis. This phenomenon is often associated with supernumerary centrosomes. Spindle assembly checkpoint (SAC) has an essential role in preventing chromosome segregation errors during anaphase. Aim of this theses was unravel the fate of multicentrosomal hESCs undergoing abnormal cell division and the functionality of SAC. Furthermore, we focused on gene construct preparation intended for centrosome labeling and their subsequent visualization during cell division.

Klíčová slova

Lidské embryonální kmenové buňky, centrozomy, multipolární dělení, kontrolní bod dělícího vřeténka, časosběrná mikroskopie, sledování jednotlivých buněk, bakteriální arteficiální chromozomy, Human embryonic stem cells, centrosomes, multipolar division, spindle assembly checkpoint, time-lapse microscopy, cell tracking, bacterial arteficial chromosomes

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 23. 2. 2021

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 27. 4. 2021
• Vedoucí: doc. MVDr. Aleš Hampl, CSc.
• Oponent: prof. MVDr. Jan Motlík, DrSc., Mgr. Jiří Pacherník, Ph.D.

Masarykova univerzita

Lékařská fakulta

Doktorský studijní program / obor:
Biomedicínské vědy / Morfologie buněk a tkání