Onkogen cRET a jeho aktivita v krátkodobě a dlouhodobě kultivovaných lidských embryonálních kmenových buňkách

Bc. Hana Zmrzlá

Master's thesis

RET oncogene and its activity in normal and culture adapted human embryonic stem cells

Abstract:

Lidské embryonální kmenové buňky jsou pluripotentní a mají schopnost sebeobnovy. Díky těmto unikátním vlastnostem by mohly být využity v léčbě řady dosud nevyléčitelných onemocnění. Pro použití v klinické medicíně je však nutné dokonale zvládnout jejich dlouhodobou kultivaci in vitro a přesně pochopit jejich regulační mechanismy. Jedním z problémů dlouhodobé kultivace je adaptace těchto buněk na in vitro podmínky a změny s tím související. Tento proces zahrnuje řadu genetických a epigenetických změn a v některých ohledech nápadně připomíná nádorovou transformaci. Z tohoto důvodu je žádoucí studovat souvislost exprese onkogenů s procesem adaptace. Jedním z mnoha onkogenů, které by se mohly adaptace účastnit je i protoonkogen RET (z anglického rearranged during transfection). Tento gen kóduje transmembránový tyrosinkinázový receptor, který se účastní řady procesů během embryogeneze a je nezbytný pro správný vývoj některých tkání. Mutace v genu RET způsobují řadu onemocnění včetně rakoviny. Cílem diplomové práce je popsat expresi a aktivity proteinu RET v krátkodobě a dlouhodobě kultivovaných (tzv. adaptovaných) lidských embryonálních kmenových buňkách z pohledu jeho možné účasti v nádorové transformaci. Tato práce navazuje na předběžné výsledky, které ukázaly výraznou změnu aktivace RET po vystavení buněk exogennímu FGF-2.

Abstract:

Human embryonic stem cells are pluripotent and they are able to self- renew. Thanks to these unique features they could be used for treatement of some incurable disorders. However, it is necessary to manage their long term cultivation and exactly understand their molecular mechanisms of regulation before their clinical use. One of the problems of long-term cultivation is adaptation of these cells to in vitro conditions and to related changes. This process involves many genetic and epigenetic changes which are simillar to cancer process. This is the reason for studying an onkogene-expression in association with the adaptation process. One of many onkogenes which could be involved in adaptation precess is RET-protoonkogene. This gene encodes a transmembrane receptor tyrosine kinase which takes part in many processes during embryogenesis and it is essential for correct development of some tissues. Mutations in RET-gene implicate many disorders inclusive cancer. The aim of this work is to describe the RET-expression and the RET-protein activity in short-term and long-term cultured human embryonic stem cells with attention paid to its possible attendance in cancer process. This work folows preliminary results, that showed distinct RET-activation change after exposition of exogenous FGF-2.

Keywords

lidské embryonální kmenové buňky, pluripotence, sebeobnova, adaptace, tyrosinkinázový receptor, RET, FGF-2, human embryonic stem cells, pluripotency, self-renewal, adaptation, tyrosin kinase receptor

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 13. 5. 2010

Thesis defence

• Date of defence: 3. 6. 2010
• Supervisor: prof. Ing. Petr Dvořák, CSc.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / field:
Biology / General Biology