Mikroprostředím-navozená ochrana maligních lymfocytů při testování inovativních protinádorových látek

Bc. Marie Kašpárková

Master's thesis

Microenvironment-induced protection of malignant lymphocytes in the testing of innovative anti-cancer agents

Abstract:

Chronická lymfocytární leukémie (CLL) je nejčastější leukémií v Západním světě a stále patří mezi nevyléčitelná onemocnění. Zásadní obtíž v léčbě představuje rezistence způsobená defekty v genu TP53, která se týká i fludarabinu, stěžejního léku pro toto onemocnění. Jednou z možností cílené terapie by mohlo být využití přítomnosti defektů TP53 pro koncept tzv. syntetické letality. Vhodným cílem pro komplementární inhibice se jeví protein Chk1, protože by tak mohly být odstraněny všechny kontrolní body buněčného cyklu a navozena mitotická katastrofa. V rámci diplomové práce jsem vytvořila ko kultivační systém stimulující CLL buňky k proliferaci, s následnou aktivací proteinu Chk1. Prostřednictvím testů viability a detekce apoptózy pomocí průtokové cytometrie a westernového přenosu jsem prokázala, že senzitivizace na nukleosidový analog fludarabin skrze inhibici Chk1 je možná u některých vzorků, včetně těch s defekty v genu TP53.

Abstract:

Chronic lymphocytic leukemia (CLL) represents the most common leukemia in the Western world and still belong among incurable disease. A resistance caused by TP53 gene defects is a major obstacle of effective therapy, and this concerns also fludarabine, a principal drug for this disease. One of the possibilities for targeted therapy could be to utilize TP53 defects´ presence for the concept of so called synthetic lethality. A suitable target for complementary inhibition seems to be a Chk1 protein, because its inhibition should result in a loss of all major cell cycle checkpoints and subsequent mitotic catastrophe. Within the diploma thesis, I elaborated co-culture system stimulating CLL cells to proliferation accompanied by the Chk1 protein activation. Using the viability testing and apoptosis detection by flow-cytometry and western blotting, I proved that sensitization to nucleoside analog fludarabine through the Chk1 inhibition is possible in some samples, including those harboring TP53 defects.

Keywords

chronická lymfocytární leukémie, CLL, stimulace, Chk1, CH900776, OH209EN1, TP53, fludarabin, chronic lymphocytic leukemia, stimulation, fludarabine

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 15. 5. 2017

Thesis defence

• Date of defence: 8. 6. 2017
• Supervisor: doc. Mgr. Martin Trbušek, Dr.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / field:
Experimental Biology / Molecular Biology and Genetics